由于对胎儿造成的潜在痛苦,已经提出了关于血液收集过程的伦理问题。虽然缺氧或主动屠宰可用于在血清收获前诱导失去意识或死亡,但将未出生的活牛犊暴露于氧气可使其在被杀之前获得认识,导致关于收获血清的伦理学的激烈争论。
胎牛血清可从许多制造商商购获得,并且因为体外培养的细胞高度敏感,所以客户通常测试特定批次以检查其特定细胞类型的适合性。当从批次改变为批次时,通常使细胞适应新批次的材料,例如,通过将50%的旧血清与50%的新血清混合并使细胞适应新材料。
将血清冷冻保存以保持组分(例如生长因子)的稳定性。当血清解冻时,可能会看到一些沉淀。这是一种正常现象,它不会以任何方式损害血清质量。通过将血清转移至无菌管并以400× g离心5分钟,可以除去沉淀物。
为了限制沉淀量,建议将血清在2-8˚C的冰箱中解冻。在此过程中应定期混合血清。应避免重复的冷冻/解冻循环,建议在冷冻前将血清分配成单次使用的等分试样。
gibco胎牛血清海智的FBS含有许多细胞生长所需的复杂蛋白质组分,这就是它成功用于细胞培养的原因。不幸的是,大量未定义的蛋白质会导致不必要的细胞刺激。这就是为什么'血清饥饿'常用于需要测量细胞因子表达细微变化的实验中。这是FBS可用于维持细胞的地方,但在实验之前,血清在细胞通过后被除去以使细胞因子表达正常化。另一种可能的方法是使用炭剥离的FBS,其似乎对培养中的细胞不具有刺激作用,同时支持健康细胞层的生长。